【摘 要】
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目的探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路在肝癌细胞系中的相互作用。方法应用RT-PCR法检测Oct4、Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路相关基因β-catenin、
【机 构】
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郧阳医学院附属东风总医院肝脏外科研究所
【基金项目】
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湖北省教育厅重点资助项目(D200724003);十堰市科技局科技攻关项目(十科发[2008]024D);郧阳医学院创新团队资助项目(2008CXG03)
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目的探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路在肝癌细胞系中的相互作用。方法应用RT-PCR法检测Oct4、Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路相关基因β-catenin、Wnt10b、TCF3及ELF、Smad3和Smad4在肝癌组织及细胞系中的表达;使用siRNA沉默人肝癌HepG2细胞Oct4和TCF3的表达,实时荧光定量RT-PCR法检测Wnt10b、β-catenin、TCF3及ELF、Smad3和Smad4等基因的表达变化。结果 Oct4和β-catenin、Wnt10b、TCF3及ELF、Smad3和Smad4在肝癌组织及细胞系中同时表达;siRNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4后,Oct4表达明显下调,β-catenin、Wnt10b随之下调达40%～50%左右,而TCF3表达升高到3倍左右;同时ELF、Smad3和Smad4均下降到原来的1%以下;而siRNA-TCF3沉默TCF3后,Oct4的表达也升高2～3倍;ELF升高亦达2～3倍,Smad3和Smad4也略有升高。结论 Oct4和β-catenin、Wnt10b、TCF3及ELF、Smad3和Smad4在肝癌组织及细胞系中同时表达提示彼此之间有相互作用。RNAi实验证明Oct4对Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路的成员有调控作用;Oct4与TCF3之间的负反馈作用值得深入研究。
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