探讨p53亚体Δ40p53对p53促肿瘤细胞凋亡作用的影响。
方法体外培养HCT116－p53－/－结肠癌细胞系(内源性表达Δ40p53)、HCT116－p53＋/＋结肠癌细胞系(内源性表达野生型p53)和H1299肺癌细胞系(p53缺失)，感染p53腺病毒使p53过表达，转染Δ40p53质粒使Δ40p53过表达。逆转录聚合酶链反应(RT－PCR)检测Δ40p53和p53 mRNA，实时荧光定量PCR检测Δ40p53对p53转录水平的影响，Western blot检测相关蛋白的表达，免疫共沉淀检测Δ40p53与p53相互作用关系，Calcein－AM/PI染色和流式细胞术检测细胞凋亡水平。
结果Δ40p53在HCT116－p53－/－细胞中能够稳定转录并表达。实时荧光定量PCR和Western blot检测显示，Δ40p53对p53的转录及表达水平无影响。免疫共沉淀检测显示，Δ40p53与p53能相互结合。Calcein－AM/PI染色显示，H1299－Control组、HCT116－p53－/－－Control组、H1299＋p53组、HCT116－p53－/－＋p53组、H1299＋奥沙利铂(Oxa)组、HCT116－p53－/－＋Oxa组、H1299＋p53＋Oxa组和HCT116－p53－/－＋p53＋Oxa组的细胞凋亡率分别为(2.50±0.47)%、(2.40±0.32)%、(5.20±0.58)%、(4.10±0.18)%、(22.40±1.73)%、(19.30±1.11)%、(29.90±1.15)%和(39.30±2.26)%。H1299＋p53＋Oxa组与HCT116－p53－/－＋p53＋Oxa组的细胞凋亡率差异有统计学意义(t＝3.721，P＝0.021)。Calcein－AM/PI染色显示，H1299－Control组、H1299＋Δ40p53组、H1299＋p53组、H1299＋p53＋ Δ40p53组、H1299＋Oxa组、H1299＋Δ40p53＋Oxa组、H1299＋p53＋Oxa组和H1299＋p53＋Δ40p53＋Oxa组的细胞凋亡率分别为(2.60±0.35)%、(2.20±0.17)%、(4.80±0.49)%、(4.90±1.10)%、(20.30±1.10)%、(19.60±1.45)%、(27.90±1.39)%和(35.20±1.43)%，H1299＋p53＋Oxa组与H1299＋p53＋Δ40p53＋Oxa组的细胞凋亡率差异有统计学意义(t＝3.629，P＝0.022)。流式细胞术检测显示，H1299－Control组、H1299＋Δ40p53组、H1299＋p53组、H1299＋p53＋Δ40p53组、H1299＋Oxa组、H1299＋Δ40p53＋Oxa组、H1299＋p53＋Oxa组和H1299＋p53＋Δ40p53＋Oxa组的细胞凋亡率分别为(2.70±0.32)%、(2.20±0.24)%、(4.60±0.48)%、(3.90±0.67)%、(19.30±1.11)%、(17.70±0.66)%、(28.30±2.76%)和(37.50±1.51)%，H1299＋p53＋Oxa组与H1299＋p53＋Δ40p53＋Oxa组的细胞凋亡率差异有统计学意义(t＝2.930，P＝0.042)。
结论Δ40p53与p53可相互结合，并能够增强p53的促肿瘤细胞凋亡作用。