华支睾吸虫成虫转录辅激活因子基因在原核细胞中的克隆、表达及其生物功能分析

• 作 者: 张咏莉 余新炳 吴德 吴忠道 毕惠祥
• 机 构: 中山大学基础医学院病原生物学部寄生虫教研室
• 出 处: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志
• 发表日期: 2005年1期
• 关键词: 华支睾吸虫 TC 基因 ET 大肠埃希菌 表达 重组质粒 辅激活因子 转录 重组蛋白 Clonorchis sinensis Transcriptional c

目的构建华支睾吸虫成虫转录辅激活因子(transcriptional coactivator, TC)基因(TC基因)原核重组质粒, 进行原核表达、鉴定及生物功能分析. 方法根据TC基因已知序列设计1 对引物, 从华支睾吸虫成虫 cDNA 文库中扩增TC基因片段;将目的基因进行聚合酶链反应(PCR), 其产物和空质粒pGEX-4T-1、pET30a(+)同时用限制性内切酶 BamHⅠ、 SalⅠ双酶切, 纯化回收后连接并转化大肠埃希菌( E.coli BL21).将构建的重组质粒pGEX-4T-1-TC和