【摘 要】
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目的 为耐核糖核酸酶(RNase)的RNA标准品和质控品的表达制备提供一个通用载体平台.方法 将 MS2 噬菌体基因组中包括的成熟酶蛋白和包膜蛋白的基因编码序列的1.7kb cDNA目的
【机 构】
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山东省茌平县人民医院,山东,茌平,252100
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目的 为耐核糖核酸酶(RNase)的RNA标准品和质控品的表达制备提供一个通用载体平台.方法 将 MS2 噬菌体基因组中包括的成熟酶蛋白和包膜蛋白的基因编码序列的1.7kb cDNA目的 片段,用Hind Ⅲ和EcoR Ⅰ酶切后,与用相同内切酶酶切的表达载体质粒pET28b,在T4 DNA连接酶的存在下连接,构建一新的表达载体pI NCCL,再转化BE21-DE3 E.Coli进行原核表达.结果 成功构建得到了新的表达载体pI NCCL,经原核表达为耐RNase的病毒样颗粒.结论 本研究得到的pI NCCL表达载体及原核表达系统,可作为一个耐RNase的RNA标准品和质控品的构建和制备表达通用载体平台,将促进有关标准品和质控品的研究.
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