Ssp dnaB蛋白质内含子介导的精氨酸激酶N末端结构域的表达

• 作 者: 石玉林 王博 姚蜜蜜 汪劲松
• 机 构: 湖北师范学院生命科学学院
• 出 处: 湖北师范学院学报：自然科学版
• 发表日期: 2011年4期
• 关键词: 精氨酸激酶 蛋白质内含子却DnaB N端结构域 融合蛋白 蛋白质剪切 镍亲和层析 arginine kinase N- domain intein Ssp D
• 基金项目: 湖北省自然科学基金（2005AB192）、黄石市2010年度科技计划项目资助.

采用聚合酶链式反应（PCR）扩增精氨酸激酶（Arginine kinase，AK）N端基因片段，经双酶切后连接至含有蛋白质内含子SspDnaB基因的质粒载体pTWIN1中，将SspdnaB和N—domain的融合基因利用双酶切手段重组到含有组氨酸标签（His—tag）的质粒载体pET-28a中，得到含有组氨酸标签的融合蛋白基因，并在大肠杆菌Rosetta中表达，为获得具有天然氨基酸序列的精氨酸激酶N端结构域打下基础。