【摘 要】
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磷脂酶D(phospholipase D,PLD)可以催化磷脂的磷酸二酯键水解和转磷脂酰基反应,目前已广泛应用于化工和医药等行业.该研究利用交联酶聚集体(cross-linked enzyme aggregates,CLEAs)技术开发了一种新型的PLD交联聚集体固定化酶(PLD-CLEAs).以酶活性回收率为指标,确定了PLD-CLEAs的最佳制备条件:饱和度60％的硫酸铵为沉淀剂,质量分数0.125％的戊二醛为交联剂,交联反应时间为1.5h,此时PLD-CLEAs的酶活力回收率为118.8％.与游离酶
【机 构】
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工业发酵微生物教育部重点实验室,天津市工业微生物重点实验室,工业酶国家工程实验室,天津科技大学生物工程学院,天津,300457
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磷脂酶D(phospholipase D,PLD)可以催化磷脂的磷酸二酯键水解和转磷脂酰基反应,目前已广泛应用于化工和医药等行业.该研究利用交联酶聚集体(cross-linked enzyme aggregates,CLEAs)技术开发了一种新型的PLD交联聚集体固定化酶(PLD-CLEAs).以酶活性回收率为指标,确定了PLD-CLEAs的最佳制备条件:饱和度60％的硫酸铵为沉淀剂,质量分数0.125％的戊二醛为交联剂,交联反应时间为1.5h,此时PLD-CLEAs的酶活力回收率为118.8％.与游离酶相比,PLD-CLEAs最适pH值向中性偏移,由8.0变为7.0;且PLD-CLEAs在较宽的温度和pH范围内均保持较高的酶活性,在高温(50℃)下的热稳定性明显提高.另外,在重复使用10次后,PLD-CLEAs仍能保持50.4％的酶活性.研究结果表明,PLD-CLEAs具有比游离酶更优异的热稳定性、pH耐受性和重复使用稳定性,有良好的工业应用前景.
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