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目的构建含EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白基因2A(LMP2A)的逆转录病毒表达载体,筛选建立携带该基因的高滴度产毒细胞系。方法逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)扩增获取目的基因LMP2A,定向插入逆转录病毒表达载体pMSCVpuro,形成重组质粒pMSCVpuro-2A,脂质体法将pMSCVpuro-2A转染逆转录病毒包装细胞PT67。嘌呤霉素筛选产毒细胞克隆,扩大培养产毒细胞克隆,收获病毒进行滴度测定,RT-PCR检测产毒PT67细胞目的基因的转录表达。结果限制性酶切、PCR及测序鉴定证实LMP2A正确