庚型肝炎病毒基因组全长cDNA的拼接及克隆

• 作 者: 朱分禄 邵力
• 机 构: 第二军医大学基础医学部微生物学教研室,日本册形大学医学院
• 出 处: 第二军医大学学报
• 发表日期: 1998年4期
• 关键词: 全长CDNA 拼接 克隆 庚型肝炎病毒 基因组 GBVC/HGV genome full-length cDNA splicing cloning
• 基金项目: 国家自然科学基金

目的：构建ＧＢ病毒Ｃ／庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）基因组全长ｃＤＮＡ克隆。方法：以覆盖ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ分离株ＨＧＶ－Ｉｗ全长基因组且互相重叠的５个基因片段Ｉｗ５，Ｉｗｑ２，Ｉｗｈ６，Ｉｗ３′和Ｉｗ３为起始材料，采用重叠延伸ＰＣＲ拼接和连接酶连接的方法，构建ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ基因组全长ｃＤＮＡ克隆。结果：ＧＢＶ／Ｃ／ＨＧＶ基因组全长ｃＤＮＡ克隆的酶切图谱与预期一致；核苷酸序列分析显示，克隆的