【摘 要】
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目的探讨Survivin反义核酸对紫杉醇诱导白血病细胞系HL-60细胞凋亡的影响.方法将已构建成功的Survivin反义核酸真核表达载体pcDNA3-SVVas电转染HL-60细胞,并筛选转染成功的阳性克隆;锥虫蓝拒染法观察Survivin反义核酸与紫杉醇联合应用对HL-60细胞增殖的影响;细胞计数和MTT实验测定转染细胞对紫杉醇敏感性;琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡DNA断裂情况;核染色检测凋亡细胞
【机 构】
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430030,武汉,华中科技大学同济医学院免疫学系,内蒙古农业大学医院,无锡市第三人民医院,
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目的探讨Survivin反义核酸对紫杉醇诱导白血病细胞系HL-60细胞凋亡的影响.方法将已构建成功的Survivin反义核酸真核表达载体pcDNA3-SVVas电转染HL-60细胞,并筛选转染成功的阳性克隆;锥虫蓝拒染法观察Survivin反义核酸与紫杉醇联合应用对HL-60细胞增殖的影响;细胞计数和MTT实验测定转染细胞对紫杉醇敏感性;琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡DNA断裂情况;核染色检测凋亡细胞的细胞核变化.结果转染Survivin反义核酸的HL-60 SVVas细胞增殖明显受抑,与HL-60 neo细胞、HL-60细胞进行比较,差异具有显著性(P<0.05);MTT实验显示,紫杉醇对HL-60 SVVas、HL-60 neo、HL-60细胞的IC50值分别为(14.4±1.87) ng/ml,(31.9±6.38) ng/ml和(32.0±6.52) ng/ml.统计学分析证明差异具有显著性(P<0.01);经琼脂糖凝胶电泳,HL-60 SVVas细胞可见到DNA梯形条带,而HL-60 neo、HL-60细胞未见到;与HL-60 neo、HL-60细胞相比,HL-60 SVVas的细胞核呈致密浓染.结论 Survivin反义核酸可促进紫杉醇诱导HL-60细胞凋亡.
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