实验用近交系小型猪WZSP表皮干细胞建系的初步研究

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目的 将五指山猪(Wuzhi Shan Pigs,WZSP)表皮干细胞传至15代以上,初步建立实验用近交系小型猪WZSP表皮干细胞系.方法 采集WZSP耳组织,通过中性蛋白酶消化获得表皮细胞,再通过0.25%胰酶+0.02%EDTA消化制成单个表皮细胞悬液,接种在Ⅳ型胶原包被的培养瓶内,采用无血清条件培养基培养,0.25%胰酶消化传代.对所培养表皮干细胞进行AKP染色鉴定.结果 表皮干细胞能够快速粘附在Ⅳ型胶原上,呈克隆状生长,已传至15代以上,传代间隔为7 d左右;取第5代细胞进行AKP染色呈阳性.结论 在本实验条件下,建立ESCs细胞系是可能的,经鉴定,所培养细胞具有干细胞基本特性.
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