人可诱导共刺激分子胞外片段和小鼠免疫球蛋白Ig融合基因的表达及生物学活性鉴定

• 作 者: 王健 张军 张燕 沈茜
• 机 构: 第二军医大学长海医院中心实验室
• 出 处: 第二军医大学学报
• 发表日期: 2005年3期
• 关键词: 可诱导共刺激分子 龟疫球蛋白 融合基因 基因表达 inducible costimulator immunoglobulins fusion gene gene
• 基金项目: 国家高技术研究发展计划(863计划)

目的:探讨用基因工程方法表达的人可诱导共刺激分子(ICOS)与小鼠免疫球蛋白的融合蛋白竞争抑制ICOSB7RP1共剌激通路的作用.方法:以RT-PCR方法克隆编码人ICOS胞外片段,与编码小鼠免疫球蛋白IgG恒定片段(Ig)的基因融合,构建携带融合基因的高效真核表达载体pcDNA4/HisMAX A-ICOS-Ig.采用脂质体法转染CHO细胞,用Western 印迹法检测稳定表达细胞中融合基因的表达,流式细胞术检测重组蛋白的配体结合活性.以适当浓度的重组融合蛋白作为拮抗剂与BALB/c和C57BL小鼠脾单