有效抑制小鼠小胶质细胞上Toll样受体9表达的siRNA的筛选

• 作 者: 杨碧莹 彭晴霞 潘经锐 王艺东
• 机 构: 中山大学孙逸仙纪念医院神经科
• 出 处: 中华脑科疾病与康复杂志(电子版)
• 发表日期: 2014年6期
• 关键词: 小神经胶质细胞 RNA 小分子干扰 TOLL样受体9 Microglia RNA small interfering Toll like receptor

目的：筛选有效抑制小鼠小胶质细胞（BV-2细胞）上Toll样受体9（TLR9）表达的小干扰RNA（siRNA）序列，并检测转染复合物的细胞毒性。方法设计并合成针对TLR9的3对siRNA（siRNA-836、siRNA-1549和siRNA-2410）及一条带绿色荧光标记（FAM）的通用阴性对照FAM-siRNA。在X-tremeGENEsiRNA转染试剂介导下转染BV-2细胞。倒置荧光显微镜下观察转染后BV-2细胞FAM-siRNA的分布，流式细胞仪检测转染效率，q-PCR检测TLR9的mRNA表达，W