利用荧光蛋白示踪脑微血管内皮细胞微丝的动态变化

• 作 者: 杜书嵩 赵伟东
• 机 构: 中国医科大学生命科学学院发育细胞生物学教研室,中国医科大学附属第一医院肛肠外科
• 出 处: 中国医科大学学报
• 发表日期: 2020年8期
• 关键词: Lifeact 肌动蛋白 脑微血管内皮细胞 活细胞显微成像术 Lifeactactinbrain microvascular endothelial cells
• 基金项目: 国家自然科学基金(31670845,31870832)

目的利用活细胞显微成像术对脑微血管内皮细胞内肌动蛋白的动态变化实现实时观察。方法构建绿色荧光蛋白(GFP)标记Lifeact的真核表达载体即Lifeact-pEGFP,利用脂质体转染法将Lifeact-pEGFP质粒转染至脑微血管内皮细胞中,利用共聚焦激光扫描显微镜对Lifeact-pEGFP在细胞内的分布进行分析,并检测其在细胞伸展和迁移过程中的动态变化。结果成功将Lifeact-p EGFP质粒转染至人脑微血管内皮细胞,细胞存活未受到影响。Lifeact-pEGFP能将活细胞中的肌动蛋白丝标记为绿色荧