pBI121-LyrZ-GFP表达载体的构建及其在和田苜蓿愈伤组织中的转化

• 作 者: 柴燕文 马晖玲 谢小冬 毛娟 田晓玲 任振新
• 机 构: 甘肃农业大学草业学院,兰州大学生命科学学院
• 出 处: 农业生物技术学报
• 发表日期: 2008年5期
• 关键词: 植物表达载体 绿色荧光蛋白基因 和田苜蓿 基因转化 plant expression vector green fluorescent protein （GFP
• 基金项目: 基金项目：甘肃省农牧厅农业生物技术研究与应用开发项目（No.GNSW.2007.03）、甘肃省科技攻关重点项目（No.2GS042-A43-013-04）和国家自然科学基金项目（No.30371745）资助.

将绿色荧光蛋白（GFP）基因片段插入到pBI121-Lyz多克隆区，构建了重组表达载体pBIl21-Lyz-GFP。经SmaⅠ与BamHⅠ双酶切和PCR验证重组质粒，均能得到约750bp的目的片段，通过进一步测序证明，GFP基因已成功地连接到pBI121-Lyz中，且重组质粒连接方向正确。利用冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌（Agrobacterium tumenfaciens ） LBA4404,，用叶盘法转化和田苜蓿（Medicago sativa L. cv. Xinjiang Daye），筛选出具有