【摘 要】
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HBD-2-haFGF是一种具有痤疮治疗作用的新型融合蛋白.为提高重组大肠埃希菌Escherichia coli BL21 (DE3)/pET-21b-hBD-2-haFGF中hBD-2-haFGF基因的表达水平,本研究尝试优化其
【机 构】
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广东药科大学生命科学与生物制药学院,广东省生物活性药物研究重点实验室,广州,510006;广州新海医院,广州,510300
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HBD-2-haFGF是一种具有痤疮治疗作用的新型融合蛋白.为提高重组大肠埃希菌Escherichia coli BL21 (DE3)/pET-21b-hBD-2-haFGF中hBD-2-haFGF基因的表达水平,本研究尝试优化其诱导表达条件.分别选取IPTG浓度、诱导温度、培养基pH和诱导时间进行单因素试验,在此基础上设计4因素3水平响应面实验,以蛋白表达量作为考察指标.经过响应面分析,响应面二次回归方程为y=55.33-1.59A+0.754B +0.26C +6.33D-0.56AB +5.42AC +9.66AD-2.12BC-0.93BD-2.84CD-4.73A2-8.11B2-1.74C2-4.33D2.BL21 (DE3)/pET-21 b-hBD-2-haFGF的最优表达条件为:诱导温度39.52℃,IPTG浓度0.60 mmol/L,pH值7.95,时间3h,预期灰度值为62.893.通过本研究可为进一步大量诱导制备、纯化hBD-2-haFGF蛋白提供技术支持.
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