背景 长期暴露于紫外线照射的环境中可通过破坏细胞线粒体的跨膜电位等机制促进相应组织中的细胞凋亡,包括人晶状体上皮细胞(LECs).干扰素/维甲酸诱导细胞凋亡相关基因-19(GRIM-19)位于线粒体呼吸链Ⅰ上,与紫外线照射诱导的LECs凋亡过程是否有关尚不明确. 目的 探讨GRIM-19与长波紫外线照射诱导的人LECs损伤的关系.方法 将人LECs系SRA01/04用常规培养方法在含质量分数10％胎牛血清的α-MEM培养液中进行培养,当细胞生长至对数生长期并达到80％融合时用长波紫外线照射,时间分别为5、10、15、20、25 min,长波紫外线剂量分别为30、60、90、120、150 mJ/cm2,照射后继续培养1h,对照组细胞与实验组培养方法相同,但不用长波紫外线照射.采用流式细胞技术测定各组培养的凋亡率,应用Western blot法检测各组培养上清液中GRIM-19蛋白的表达强度和相对表达量,采用单因素方差分析法对不同组间LECs凋亡率和GRIM-19蛋白相对表达量的差异进行比较,用Pearson积矩线性相关分析法评估LECs凋亡率与GRIM-19蛋白相对表达量的关系. 结果 不同剂量的紫外线照射培养的LECs后各组细胞凋亡率的总体比较差异有统计学意义(F=149.32,P＜0.01),其中60、90、120及150 mJ/cm2紫外线照射组与对照组比较,细胞凋亡率均明显增加,差异均有统计学意义(q=-17.02、-25.20、-29.41、-8.61,P＜0.01).不同剂量的紫外线照射培养的LECs后细胞上清液中GRIM-19的表达明显增强,各组LECs上清液中GRIM-19的相对表达量(GRIM-19/β-actin)的总体差异有统计学意义(F=6.87,P＜0.05),其中60、90、120、150 mJ/cm2紫外线照射组细胞上清液中GRIM-19的相对表达量分别为2.01±0.76、2.98±1.80、3.97±1.61和2.42±1.28,均明显高于对照组的0.56±0.23,差异均有统计学意义(q=-4.12、-5.04、-7.09、-3.85,P＜0.01).Pearson积矩线性相关分析结果表明,LECs上清液中GRIM-19蛋白的相对表达量与LECs凋亡率呈正相关(r=0.71,P＜0.01).结论 正常人LECs中可见GRIM-19的表达,但紫外线引起的人LECs凋亡过程与细胞中GRIM-19的表达上调一致;GRIM-19蛋白相对表达量与长波紫外线照射呈剂量依赖性。
干扰素/维甲酸诱导细胞凋亡相关基因19表达与紫外线诱导的人晶状体上皮细胞凋亡的关系
【摘 要】
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背景 长期暴露于紫外线照射的环境中可通过破坏细胞线粒体的跨膜电位等机制促进相应组织中的细胞凋亡,包括人晶状体上皮细胞(LECs).干扰素/维甲酸诱导细胞凋亡相关基因-19(GRIM-19)位于线粒体呼吸链Ⅰ上,与紫外线照射诱导的LECs凋亡过程是否有关尚不明确. 目的 探讨GRIM-19与长波紫外线照射诱导的人LECs损伤的关系.方法 将人LECs系SRA01/04用常规培养方法在含质量分数10％
【机 构】
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110001沈阳,中国医科大学附属第一医院眼科,110001沈阳,中国医科大学附属第一医院眼科,110001沈阳,中国医科大学附属第一医院眼科,110001沈阳,中国医科大学附属第一医院眼科,1100
【出 处】
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中华实验眼科杂志
【发表日期】
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2013年31期
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