【摘 要】
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目的观察体外培养状态下心脏成纤维细胞(CFs)的形态特征和分裂增殖方式。方法原代培养新生大鼠CFs,免疫荧光双标法分别检测波形蛋白和磷酸化组蛋白H3(H3P)共表达,波形蛋白和
【机 构】
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新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室;
【基金项目】
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河南省自然科学基金(412000900)
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目的观察体外培养状态下心脏成纤维细胞(CFs)的形态特征和分裂增殖方式。方法原代培养新生大鼠CFs,免疫荧光双标法分别检测波形蛋白和磷酸化组蛋白H3(H3P)共表达,波形蛋白和微管蛋白共表达。利用活细胞工作站和荧光显微镜观察处于不同分裂期的细胞时相。结果 CFs 0.5~1h贴壁,培养2~3 d细胞增殖旺盛,大量细胞进入有丝分裂期,其中多数CFs先隆起变圆,而少数则仍维持扁平状进行分裂。偶见无丝分裂现象。圆隆型有丝分裂时长为20~30min,扁平型分裂时长为40~50min。分裂前期胞核形状规则,H3P开始表达;前中期核膜破裂,纺锤体形成;中期染色体排列在赤道面,H3P高表达,纺锤体呈典型纺锤样;后期染色单体分开并移向两极,H3P在染色单体上持续表达;末期两个子核形成,微管聚集在两子核之间;胞质分裂期,两个子细胞形成,H3P不表达。结论体外培养的CFs存在圆隆型和扁平型两种有丝分裂形态,在分裂方式上存在有丝分裂和无丝分裂两种形式。
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