丙型肝炎病毒核心蛋白稳定表达肝癌细胞株的构建及生物学研究

• 作 者: 单晓亮 刘娇 陈庆美 周帆 陈林林 权会琴 唐霓
• 机 构: 重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学教育部重点实验室
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2012年1期
• 关键词: 丙型肝炎病毒 核心蛋白 生物学功能 稳定细胞株 细胞增殖 HCV Core protein Biological function Stable cell li

旨在构建稳定表达HCV核心蛋白的稳定细胞系Huh7-Core并进行初步的生物学功能研究。利用PCR技术扩增HCV核心蛋白基因,通过酶切连接反应将目的基因克隆至载体pSEB-3Flag中,将重组质粒pSEB-3F-Core和辅助质粒pAmpho共转染Huh7细胞,经过Blasticidine抗性筛选,建立稳定表达HCV核心蛋白的肝癌细胞系Huh7-Core。采用RT-PCR、Western blot鉴定Huh7-Core细胞株中核心蛋白的稳定表达并采用MTS、结晶紫试验观察Huh7-Core稳定细胞株的增殖