【摘 要】
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目的:研究SOX2表达对人喉癌上皮细胞Hep-2化疗敏感性的影响。方法:设计合成RNAi-SOX2序列,瞬时转染Hep-2细胞,Western blot法筛选沉默效率最好的RNAi-SOX2构建pGCsi-H1-SOX2
【机 构】
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中国医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科;
【基金项目】
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辽宁省自然科学基金项目(No:201202287)
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目的:研究SOX2表达对人喉癌上皮细胞Hep-2化疗敏感性的影响。方法:设计合成RNAi-SOX2序列,瞬时转染Hep-2细胞,Western blot法筛选沉默效率最好的RNAi-SOX2构建pGCsi-H1-SOX2质粒,并构建其对照质粒pGCsi-H1-NC,分别转染Hep-2细胞建立稳定沉默SOX2表达细胞株psiSOX2-Hep-2及其对照细胞株psiNC-Hep-2。CCK-8法检测SOX2表达沉默对Hep-2细胞对化疗药物敏感性的影响;Hoechst染色法检测SOX2表达沉默对化疗药物诱导Hep-2细胞凋亡的影响;Western blot法检测SOX2表达沉默对凋亡相关基因Survivin、Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3表达的影响。结果:成功获取SOX2表达沉默细胞株psiSOX2-Hep-2及其对照psiNC-Hep-2细胞株,与psiNC-Hep-2细胞相比,psiSOX2-Hep-2中SOX2表达下降78%。SOX2表达沉默后,psiSOX2-Hep-2细胞对5-FU和紫杉醇的敏感性均增强,psiSOX2-Hep-2细胞48h的IC50值分别下降到8.12μg/ml和5.16μg/ml;同时,psiSOX2-Hep-2细胞凋亡数增多;抗凋亡基因Survivin、Bcl-2表达下降明显,凋亡基因Bax、cleaved caspase-3表达显著上升。结论:RNAi沉默SOX2表达将显著增强人喉癌上皮细胞Hep-2对5-FU和紫杉醇的敏感性。
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