组蛋白赖氨酸转移酶KAT6B基因shRNA慢病毒载体的构建与鉴定

• 作 者: 靳俊杰 安静 曹涤非 宋爱利 赵丽丽 刘兆良
• 机 构: 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院肿瘤防治研究所,黑龙江省医学科学院肿瘤防治研究所,黑龙江省科学院高技术研究院,哈尔滨工业大学化工与化学学院
• 出 处: 实用肿瘤学杂志
• 发表日期: 2018年1期
• 关键词: 载体构建 基因沉默 RNA干扰 KAT6B 慢病毒载体
• 基金项目: 国家自然科学基金(面上项目)(81472636);黑龙江省自然科学基金(省留学归国人员科学基金)(LC2015033)

目的在乳腺癌细胞T47D中利用构建的短发卡RNA（shRNA）慢病毒载体对赖氨酸乙酰转移酶6B（KAT6B/MORF）基因进行RNA干扰,通过下调该基因的表达来研究其对乳腺癌细胞的抑制功能。方法针对KAT6B基因的CDS区合成2对单链的短发卡RNA（shRNA5、shRNA8）及相应的对照组序列（Scramble5、Scramble8）,通过聚合酶链式反应（PCR）扩增后,与双酶切（EcoRl、Xhol）线性化处理的入门载体（pENTR/p SM2（CMV）GFP）同源重组,获得含有目的片段的入门克隆。再