利用自剪切融合蛋白在大肠杆菌中表达并纯化兔防御素

• 作 者: 李霞 沈昕 王义琴 张利明 赵世民 李文彬 孙勇如
• 机 构: 中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101北京林业大学生物科学与技术学院,北京,100083北京林业大学生物科学与技术学院,北京,100083;中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100
• 出 处: 高技术通讯
• 发表日期: 2005年4期
• 关键词: 防御素 自剪切融合蛋白 原核表达 蛋白纯化

将源自兔嗜中性细胞的防御素基因NP-1插入原核表达载体pTYB2,并将重组质粒pTYB2-NP1转入大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导使防御素以融合蛋白的形式表达.然后,通过亲和层析利用自剪切融合蛋白分离提纯目的蛋白.蛋白电泳检测到以二聚体形式存在的防御素,但此蛋白没有对大肠杆菌的抑菌活性.同时,对该表达纯化系统的特点和用原核生物大肠杆菌表达真核生物防御素的问题进行了分析和讨论.