花生四烯酸对人增生性瘢痕成纤维细胞体外增殖的影响

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目的 观察花生四烯酸对人增生性瘢痕(HS)成纤维细胞体外增殖的影响.方法 体外培养人HS纤维细胞,取第4代细胞用于实验.分别用0、5、10、20、40、80 μmol/L花生四烯酸作用于HS成纤维细胞24、48、72 h后,采用细胞计数试剂盒检测HS成纤维细胞增殖活力.制作HS成纤维细胞爬片,免疫细胞化学法检测上述不同浓度花生四烯酸作用24 h后细胞核中Ki-67抗原的表达情况.结果 HS成纤维细胞在未加花生四烯酸干预时,生长旺盛,形态规则,胞质丰富,胞核呈椭圆或圆形,细胞生长走向基本一致;花生四烯酸浓度为5、10 μmol/L时,细胞生长形态与未加花生四烯酸干预时未见明显区别;花生四烯酸浓度为20、40、80μmol/L时,HS成纤维细胞与未加花生四烯酸干预时比较,数目减少,细胞形状改变,部分细胞突出回缩,呈圆钝形,胞核浓缩,培养液内漂浮细胞较多.花生四烯酸作用于HS成纤维细胞24 h后,5、10、20、40、80 μmol/L组增殖抑制率分别为(1.2±1.5)%、(2.9±2.2)%、(8.8±2.3)%、(22.0±2.3)%、(37.9±2.1)%,48 h后分别为(4.3±1.4)%、(8.7±1.8)%、(18.3±1.5)%、(27.6±0.8)%、(42.7±2.2)%,72 h后分别为(4.7±1.7)%、(9.6±2.0)%、(21.6±2.1)%、(30.3±2.1)%、(47.0±2.6)%,在20 ~ 80μmol/L花生四烯酸浓度范围内,HS成纤维细胞生长抑制率随着花生四烯酸作用浓度和时间的增加而增加(P<0.05).花生四烯酸浓度为5、10 μmol/L时,Ki-67抗原表达阳性率与未加花生四烯酸时比较,差异无统计学意义(P>0.05);花生四烯酸浓度为20、40、80 μmol/L时,Ki-67抗原表达阳性率均明显低于未加花生四烯酸时[(47.1±1.6)%、(32.1±4.4)%、(18.6±2.3)%比(58.7±4.6)%](P<0.05).结论 20 ~ 80 μmol/L的花生四烯酸能抑制人HS成纤维细胞的增殖,可能是其抑制瘢痕增生作用机制之一.
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