【摘 要】
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目的:研究T细胞免疫对小鼠星形胶质细胞巨细胞病毒(CMV)感染时的免疫保护作用.方法:建立小鼠T细胞与感染巨细胞病毒的同系小鼠星形胶质细胞体外共培养的细胞模型.通过显微镜
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科病毒室
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目的:研究T细胞免疫对小鼠星形胶质细胞巨细胞病毒(CMV)感染时的免疫保护作用.方法:建立小鼠T细胞与感染巨细胞病毒的同系小鼠星形胶质细胞体外共培养的细胞模型.通过显微镜观察和绿色荧光染料CFSE标记后流式细胞术检测方法来判断T细胞克隆增殖情况;以ELISA检测共培养上清中IFN-γ和TNF-α的含量;通过观察星形胶质细胞感染CMV后特异性的细胞病变和PCR方法检测星形胶质细胞内CMV DNA的负荷量来了解T细胞针对CMV的免疫保护作用.结果:在共培养3 d后,可见到少量的T细胞克隆形成,CFSE标记的方法显示发生过增殖的T细胞占T细胞总数的(6.68±0.61)%,与未加CMV刺激的对照组有显著性差异(P＜0.01).共培养上清中的IFN-γ浓度为(22.9±3.4) ng/L,而对照组为＜8 ng/L (P＜0.05).但在试剂盒检测范围内各组均未检出TNF-α.共培养的T细胞能够减少31.25%～75%的细胞病变产生,减少～75%的CMV DNA负荷量.共培养3 d的培养细胞上清也具有免疫保护作用.而将具有免疫保护作用的T细胞与感染CMV的星形胶质细胞继续培养3 d,发现T细胞的增殖明显减少(1.83±0.25)%,培养上清中未检出IFN-γ,CMV DNA的负荷量无减少,提示T细胞的免疫功能受到抑制.结论:小鼠星形胶质细胞在感染CMV后能够刺激T细胞增殖活化;T细胞免疫能够发挥一定程度的保护作用,这种保护作用有部分是由分泌性的细胞因子介导的;T细胞活化后功能很快受到抑制,其中的机制有待进一步研究.
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