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目的:构建并鉴定反向插入VEGF165 cDNA的重组腺病毒,探讨腺病毒介导的VEGF165 反义核酸治疗胰腺癌的可行性.方法:应用基因重组技术,将513 bp的人VEGF165 cDNA反向克隆入腺病毒粘粒载体pAxCAwt.重组粘粒与腺病毒DNA-TPC混合后以磷酸钙共沉淀法转染293细胞制备重组腺病毒.建立胰腺癌裸鼠皮下种植瘤模型,瘤体内直接注射重组腺病毒,观察肿瘤的生长及血管生成情况.结果:成功构建了反向插入VEGF165 cDNA的腺病毒粘粒载体pAxCAwt-αVEGF并制备出高滴度的重组腺病