【摘 要】
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目的探讨流式细胞仪(FCM)在肿瘤耐药细胞系(S-180R与BGC-823/DOX)阿霉素耐药性检测中的应用价值。方法应用细胞药物毒性分析(MTT)、DNA分子杂交(southernblot)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组化、FCM的检测方法,在DNA、RNA、蛋白质水平以
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目的探讨流式细胞仪(FCM)在肿瘤耐药细胞系(S-180R与BGC-823/DOX)阿霉素耐药性检测中的应用价值。方法应用细胞药物毒性分析(MTT)、DNA分子杂交(southernblot)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组化、FCM的检测方法,在DNA、RNA、蛋白质水平以及耐药倍数、细胞内药物含量等方面对肿瘤耐药细胞系进行分析。结果S-180R耐药倍数66;耐药细胞多药耐药基因出现DNA扩增、RNA转录、蛋白水平的过度表达,亲本细胞为阴性。亲本细胞与耐药细胞药物荧光含量为2592.9,耐药培养2年后,耐药细胞峰半峰宽/峰高比值由0.56变为0.23。BGC-823/DOX耐药倍数为6.4倍;耐药和亲本细胞均有多药耐药基因DNA扩增、RNA转录、蛋白过度表达;亲本与耐药细胞药物荧光含量为638.5326.1。结论FCM可以直观地检测阿霉素耐药细胞,具有灵敏、准确、定量的特点,是肿瘤耐药性灵敏的、功能性检测方法
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