【摘 要】
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为监测粮食中的串珠镰刀菌污染 ,根据rDNA18S、5 8S、2 8S及其间区ITS和ITS2序列 ,设计了 1对镰刀菌属特异性引物Fu3 Fu4及 2对串珠镰刀菌种特异性引物Fu5 Fu4 (Ⅰ型ITS2特
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为监测粮食中的串珠镰刀菌污染 ,根据rDNA18S、5 8S、2 8S及其间区ITS和ITS2序列 ,设计了 1对镰刀菌属特异性引物Fu3 Fu4及 2对串珠镰刀菌种特异性引物Fu5 Fu4 (Ⅰ型ITS2特异性 )和Fu3 Fu2 (Ⅱ型ITS2特异性 ) ,建立了串珠镰刀菌PCR及复合PCR检测方法。Fu3 Fu4、Fu3 Fu2和Fu5 Fu4分别扩增 5 16bp、375bp和 188bp的DNA片段。Fu3 Fu4PCR的检出灵敏度为 10pg ,Fu5 Fu4为 10 0pg ,复合PCR(Fu3、Fu5和Fu4 )的检出限为 10 0pg ,分别相当于每次反应检出 10 3 、10 4和10 4个孢子。复合PCR可以同时鉴别镰刀菌属和串珠镰刀菌种。检测了 32株从山东、浙江、安徽和河南 4省区分离的串珠镰刀菌及交孢镰刀菌 ,2 6株为Ⅰ型ITS2特异性 ,4株为Ⅱ型ITS2特异性 ,两株待定。该方法可用于大量快速筛选串珠镰刀菌 ,有利于进一步开展串珠镰刀菌在我国的生态分布、生物地域学及系统发育学等方面的研究。该方法快速、敏感、特异 ,适宜粮食中串珠镰刀菌污染的监测。
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