【摘 要】
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目的采用长链RT-PCR技术扩增登革2型及4型病毒基因组全长cDNA,为构建登革病毒全长cDNA克隆、表达,深入阐明致病机理及探索新型疫苗奠定基础. 方法根据已测定的登革2、4型病毒
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目的采用长链RT-PCR技术扩增登革2型及4型病毒基因组全长cDNA,为构建登革病毒全长cDNA克隆、表达,深入阐明致病机理及探索新型疫苗奠定基础. 方法根据已测定的登革2、4型病毒全基因组序列,设计上下游引物.从感染登革病毒的乳鼠脑中提取病毒基因组RNA,采用长链RT-PCR技术进行扩增.为检验扩增产物的特异性,以PCR产物为模板扩增覆盖基因组的10个片段.将含有复杂二级结构的5′非编码区的扩增片段,在377A型自动测序仪进行序列分析. 结果扩增出登革2、4型病毒基因组全长近11kb cDNA分子,非编
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