【摘 要】
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目的 探究富含半胱氨酸型酸性蛋白（SPARC）敲除通过调节肝脏脂质代谢影响代谢相关性脂肪肝相关肝癌发展。方法 研究样本选取17只成年健康大鼠（对照组）及17只SPARC基因敲除大鼠（研究组）,两组各选取1只提取肝细胞进行体外实验，剩余个体均使用链脲佐菌素注射并给予高脂肪饮食诱导代谢相关性脂肪肝相关肝癌模型。观察两组大鼠病理变化及其肝细胞脂质沉积、脂质合成、脂质代谢、细胞活力相关指标及AMPK、α-
【基金项目】
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云南省地方高校（部分）基础研究联合专项面上项目（2018FH001-076）；
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目的 探究富含半胱氨酸型酸性蛋白（SPARC）敲除通过调节肝脏脂质代谢影响代谢相关性脂肪肝相关肝癌发展。方法 研究样本选取17只成年健康大鼠（对照组）及17只SPARC基因敲除大鼠（研究组）,两组各选取1只提取肝细胞进行体外实验，剩余个体均使用链脲佐菌素注射并给予高脂肪饮食诱导代谢相关性脂肪肝相关肝癌模型。观察两组大鼠病理变化及其肝细胞脂质沉积、脂质合成、脂质代谢、细胞活力相关指标及AMPK、α-Tubulin蛋白表达。结果 在第16周时，两组所有大鼠均发展为肝癌，研究组肝癌平均直径（1.39±0.14）mm显著高于对照组（1.01±0.09）mm; NAS评分显示，研究组大鼠脂肪变性评分（2.71±0.25）分显著高于对照组（1.55±0.19）分，研究组小叶炎症评分（0.74±0.09）分显著低于对照组（1.27±0.11）分。HE染色结果显示，研究组大鼠门静脉炎症减弱；天狼星红染色结果显示，研究组大鼠肝脏纤维化病变高于对照组；体外研究中，油红O染色结果显示，研究组细胞脂质沉积增加，且GL-TAG（23.15±5.39比5.73±1.47）、GPL（0.29±0.03比0.23±0.02）表达显著高于对照组；研究组肝细胞中[U-14C]-甘油表达显著高于对照组；研究组PPARγ2（1.95±0.20比1.01±0.11）、PPARα（1.27±0.12比0.98±0.09）、CD36（2.24±0.26比0.98±0.09）、FABP4（1.92±0.19比0.99±0.10）、FABP5（2.31±0.27比0.97±0.10）、ACC1（2.52±0.27比1.01±0.11）、FASN（1.28±0.13比0.99±0.09）、SREBP1（3.95±0.43比1.02±0.11）、LXRα（1.52±0.16比0.97±0.09）、CPT1（2.76±0.29比1.02±0.11）、LIPIN（2.49±0.26比1.01±0.11）、ACOX1（2.69±0.28比1.01±0.11） mRNA相对表达显著低于对照组（P＜0.05）,两组ACADSB mRNA表达差异无统计学意义（P＞0.05）;吖啶橙-溴化乙锭染色结果显示，研究组细胞活力高对照组，细胞存活率（97.89±1.44）%显著高于对照组的（48.47±1.21）%;免疫荧光检测结果显示，研究组细胞增加肝细胞中SREBP核定位，蛋白印迹实验结果显示，研究组AMPK、α-Tubulin蛋白表达低于对照组。结论 SPARC敲除可通过调节大鼠脂质代谢、细胞活力及肝细胞内脂质积累增加等途径影响代谢相关性脂肪肝相关肝癌发展。
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