【摘 要】
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目的探讨特异性下调Grp78表达后肝癌细胞对厄洛替尼敏感性的变化及其机制。方法通过用si RNA技术特异性地下调肝癌细胞SMMC-7721中Grp78的表达并做Western blotting鉴定,MTT
【机 构】
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辽宁医学院病理生理学教研室,辽宁医学院科学实验中心,
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目的探讨特异性下调Grp78表达后肝癌细胞对厄洛替尼敏感性的变化及其机制。方法通过用si RNA技术特异性地下调肝癌细胞SMMC-7721中Grp78的表达并做Western blotting鉴定,MTT法检测不同浓度(0、2.5、5、10、20μmol/L)厄洛替尼作用下肝癌细胞存活率的变化,流式细胞术检测细胞凋亡的变化,吖啶橙荧光染色法检测细胞凋亡的形态学变化,免疫印迹法检测AKT、p-AKT、ERK和p-ERK表达。结果转染si RNA-Grp78后24、48、72 h均能明显抑制Grp78的表达,其中48 h抑制效果最明显(P<0.05)。与SMMC-7721/si Control相比,厄洛替尼对SMMC-7721/si RNA-Grp78细胞具有明显的增殖抑制作用和促凋亡作用,差异有统计学意义(P<0.05)。与SM M C-7721/si Control相比,厄洛替尼可明显降低SM M C-7721/si RNA-Grp78细胞中p-ERK和p-AKT的蛋白表达(P<0.05),但总ERK和AKT蛋白表达不受影响。结论特异性下调肝癌细胞中Grp78的表达通过抑制ERK和AKT蛋白的磷酸化增强肝癌细胞对厄洛替尼的敏感性。
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