endostatin基因重组腺病毒的构建及在人肺腺癌细胞的表达

• 作 者: 魏玲 宋现让 王兴武 宋宝 郑燕
• 机 构: 山东省肿瘤医院基础研究中心
• 出 处: 中国现代医学杂志
• 发表日期: 2008年6期
• 关键词: 肺癌 腺病毒 内皮抑素 基因治疗 lung neoplasm murine endostatin gene adenovirus gene therapy
• 基金项目: 山东省卫生厅课题（课题编号：2005HW139）

目的利用AdEasy系统构建鼠内皮抑素（ES）基因重组腺病毒Ad．ES，并观察其在人肺腺癌细胞SPCA-1的表达。方法采用酶切、连接和转化等方法，将质粒pcDNA3、ES中的ES片段插入腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack．CMV，构建重组腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack．CMV．ES，经PmeⅠ酶切线性化后与含腺病毒基因骨架的质粒载体pAdEasy-1在细菌BJ5183内进行同源重组得到腺病毒质粒pAd．ES，重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切后，转染人胚肾293细胞包装成腺病毒颗粒Ad．ES，将病毒上清反复