靶向人血管内皮生长因子-C基因的shRNA真核表达载体的构建与鉴定

• 作 者: 谢晓斌 陈小卫 龙捷 张雅洁
• 机 构: 广州医学院病理教研室,广州市第一人民医院血液内科
• 出 处: 实用医学杂志
• 发表日期: 2010年4期
• 关键词: 乳腺肿瘤 血管内皮生长因子C 短发夹RNA 真核表达载体 Breast neoplasms Vascular endothelial growth facto

目的：构建靶向人血管内皮生长因子-C（VEGF-C）基因的shRNA真核表达载体并检测其对靶基因的沉默效应。方法：根据靶基因VEGF-C序列,设计、合成编码其shRNA的互补寡核苷酸序列,克隆至线性化的pSIREN-RetroQ载体中并对重组质粒进行酶切分析及测序鉴定;脂质体介导重组质粒转染乳腺癌MCF-7细胞株,荧光定量PCR及Westen-blot检测其对靶基因VEGF-C表达的影响。结果：酶切及测序鉴定重组质粒pSIREN-VEGF-C的序列正确;转染重组质粒后乳腺癌MCF-7细胞中VEGF-CmR