【摘 要】
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目的 核素125I标记hTERT/PSA双调控增殖型溶瘤腺病毒,构建125I-RSOAds-hTERT/PSA核素-溶瘤病毒标记物,并考察不同反应条件下病毒标记物标记率的影响.方法 125I标记采用N-溴代
【机 构】
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221009 江苏,徐州 徐州医科大学附属徐州临床学院泌尿外科215300 江苏,昆山 昆山市瑞科药物研发有限公司;徐州 徐州医科大学附属徐州临床学院泌尿外科, 江苏,221009;徐州 徐州医科大学
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目的 核素125I标记hTERT/PSA双调控增殖型溶瘤腺病毒,构建125I-RSOAds-hTERT/PSA核素-溶瘤病毒标记物,并考察不同反应条件下病毒标记物标记率的影响.方法 125I标记采用N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)作为氧化剂进行标记,分别设定不同浓度的溶瘤病毒和NBS进行作用,确定最佳的标记条件.分别考察125I的用量、反应时间、PH值、反应体积对125I-RSOAds-hTERT/PSA核素-溶瘤病毒标记物标记率的影响.采用凝胶柱层析法分离纯化核素-溶瘤腺病毒标记物;纸层析法测定125I-RSOAds-hTERT/PSA标记物不同时间的放射性纯度.结果 125I-RSOAds-hTERT/PSA放化纯度达95％以上,4℃冰箱放置7d其放化纯度基本稳定,保持在93％ ～94％.125I用量为0.5 μL(约0.2 mCi,7.4 MBq),NBS用量为25μg,8×109 VP/mL,125I-RSOAds-hTERT/PSA病毒液用量为100 μL,反应时间为3 min,PH值为7.5,加入PBS体积120 μL为最优条件.结论 核素125I标记hTERT/PSA双调控增殖型溶瘤腺病毒确切可行,标记物在一定条件下放化纯度稳定.
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