【摘 要】
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为了探讨Ca2+荧光探针Fluo-3 AM对大鼠心肌微血管内皮细胞(Rat Myocardial Microvascular Endothelial Cells RMMECs)最佳装载浓度和时间。将Fluo-3 AM分别稀释成1、2、3、4
【机 构】
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北京农学院动物科学技术学院/兽医学（中医药）北京市重点实验室,北京农学院/农业应用新技术北京市重点实验室
【基金项目】
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北京市教委科技发展计划重点项目“中药提高微血管自律运动振幅的生物学意义研究”(KZ201110020021);国家自然科学基金“提高微血管自律运动振幅的中药成分抗致病因子伤害的机制研究”(31101850);北京市教委人才强教深化计划-学术创新团队“白头翁汤治疗细菌内毒素的机理及有效成分研究”(PHR201007142);科研基地-科技创新平台“抗菌中兽药成分组方原则及新兽药研发”(PXM20
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为了探讨Ca2+荧光探针Fluo-3 AM对大鼠心肌微血管内皮细胞(Rat Myocardial Microvascular Endothelial Cells RMMECs)最佳装载浓度和时间。将Fluo-3 AM分别稀释成1、2、3、4、5μM/L,每一浓度的探针分别装载细胞5、10、15、20min,应用激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内荧光信号的强度、位置、装载探针后细胞的形态来观察装载效果。结果表明:1～3μM/L的Fluo-3 AM负载5～20min均不出现荧光信号;4μM/L的Fluo-3 AM负载5～10min时即出现荧光信号;5μM/L的Fluo-3 AM孵育细胞15min后出现清晰且分布均匀的荧光信号。Fluo-3 AM对贴壁生长的RMMECs负载效果主要受探针浓度和负载时间的影响。
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