乙醇脱氢酶Ⅰ类基因全长cDNA的克隆与表达

• 作 者: 周文婷 崔羽 王晓燕 张永红 李世荣 李景鹏
• 机 构: 东北农业大学生命科学与生物技术中心,哈尔滨,150030哈尔滨医科大学附属第四医院检验科,哈尔滨,150001
• 出 处: 东北农业大学学报
• 发表日期: 2007年5期
• 关键词: 乙醇脱氢酶(ADH) 基因克隆 原核表达 酶活力检测

Ⅰ类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中发挥重要作用,由ADH1,ADH2和ADH3组成.根据序列数据设计一对引物,利用RT-PCR同时克隆乙醇脱氢酶Ⅰ类基因全长cDNA.测序后的cDNA被克隆在表达载体pTYB11上并在大肠杆菌中稳定表达.纯化获得的酶通过其在340 nm处吸光值的变化进行酶活性测定.经检测重组ADH1,ADH2和ADH3的酶活力分别为2.0±0.3,0.8±0.2,1.5±0.2 U·mg-1.