过氧化物上调人结肠癌细胞血管内皮生长因子的表达

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目的探讨过氧化氢等活性氧类对于大肠癌的进一步发展可能存在的影响.方法以低浓度过氧化氢(10-5 mol/L、10-7mol/L及10-9mol/L)作用人结肠癌细胞系LS174T和HCT8共24h,与人血管内皮细胞系ECV-304共培养,观察过氧化氢对结肠癌细胞诱导的内皮细胞迁移的影响.以逆转录-聚合酶链反应、酶联免疫吸附分析检测相对定量过氧化氢作用下癌细胞血管内皮生长因子的表达强度,以放线菌素D(1.5μg/ml)抑制癌细胞的转录观察过氧化氢产生作用的机制,同时以激光扫描细胞仪直接定量肿瘤细胞NF-KappaB活性的变化.结果外源性低浓度过氧化氢促进两种结肠癌细胞诱导的内皮细胞迁移,其中在10-5mol/L过氧化氢的作用下,LS174T诱导的迁移数为202.6±70.2(个)(与对照组比t=3.475 1,P=0.0083),HCT8诱导的迁移数为145.4±65.3(个)(与对照组比t=4.418 3,P=0.0084),高于同组其余各浓度引起的迁移数目.同时癌细胞血管内皮生长因子的表达也见增强,放线菌素D能阻断过氧化氢的这种作用.半衰期分析提示过氧化氢未影响血管内皮生长因子mRNA的稳定性.两种癌细胞NF-KappaB的活性在24h的过氧化氢作用后获得提高,这与血管内皮生长因子的增强表达情形相仿.结论过氧化氢在一定程度上促进结肠癌细胞增强表达血管内皮生长因子,过氧化氢等活性氧可能有利于结肠癌的进一步发展.
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