目的将TPT1转染肝癌细胞系SMMC-7721和肝细胞系L-02，观察肝细胞系生物学行为的变化。方法将连有TPT1的、带有绿色荧：圯蛋白标签的真核报告表达载体pEGFP-N3TPT1，通过Lipofectamine分别转染SMMC-7721和L-02细胞，同时设pEGFP—N3对照。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测TPT1 mRNA水平，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法、软琼脂克隆形成实验、细胞周期分析检测细胞增殖和致瘤性。结果pEGFP—N3TPT1转染后，SMMC-7721细胞TPT1 mRNA相对表达水平与对照组的比值为1．78，L-02细胞TPT1 mRNA相对表达水平与对照组的比值为2．59。pEGFP-N3TPTI转染可明显增强肝细胞的增殖能力，转染SMMC-7721后24、48、72、96h的吸光度（A）值分别为0．80、1．56、2．69和2．94，均高于pEGFP-N3（分别为0．71、1．23、1．92和2．75）和脂质体对照（分别为0．76、1．27、1．89和2．78），差异均有统计学意义（均P〈0．05）。在接种500个和1000个细胞时，pEGFP—N3TPT1组软琼脂克隆形成数分别为（6．00±1．73）个和（12．00±2．65）个，pEGFP—N3组软琼脂克隆形成数分别为（1．00±1．00）个和（7．004-1．00）个（P〈0．05）。pEGFP—N3TPTI转染后的SMMC-7721细胞增殖指数（PI）为40．9％，高于pEGFP—N3组（26．4％）。EGFP—N3TPT1转染正常肝细胞L-02后，24、48、72、96、120h测得的A值分别为0．87、1．11、1．55、2．12和2．42，均高于pEGFP—N3组（分别为0．65、0．79、1．02、1．49和1．96）和脂质体组（分别为0．67、0．82、0．89、1．56和1．85），差异有统计学意义（P〈0．05）；pEGFP—N3TPT1组平板克隆数为（18．00±2．00）个，pEGFP—N3组为（7．00±2．65）个（P〈0．05），但L-02细胞不能在软琼脂中形成克隆。pEGFP—N3TPT1转染后L-02细胞的PI为35．9％，高于pEGFP-N3组（26．1％）。结论TPT1转染可增强肝癌细胞SMMC一7721的恶性表型，促进正常肝细胞L-02的增殖能力，但不能使L-02发生恶性转化。
肝细胞癌高表达基因TPT1转染对肝细胞系生物学行为的影响
【摘 要】
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目的将TPT1转染肝癌细胞系SMMC-7721和肝细胞系L-02，观察肝细胞系生物学行为的变化。方法将连有TPT1的、带有绿色荧：圯蛋白标签的真核报告表达载体pEGFP-N3TPT1，通过Lipofectamine分别转染SMMC-7721和L-02细胞，同时设pEGFP—N3对照。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测TPT1 mRNA水平，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法、软琼脂克隆形成实验、细
【机 构】
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河南省人民医院肿瘤科,郑州450003,郑州大学消化疾病研究所,河南省人民医院肿瘤科,郑州450003,河南省人民医院肿瘤科,郑州450003
【发表日期】
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2011年33期
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本刊对一些读者较为熟悉且常用的词汇作如下规定：自2011年始，以下词汇在文章的正文中首次出现时给出中文全称和英文缩略语即可，再次出现时可直接用缩略语。
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