【摘 要】
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目的通过筛选乙型肝炎病毒(HBV)核心启动子(core promoter)结合蛋白,为HBV复制机制的研究探索新的途径.方法应用噬菌体表面展示技术,以HBV核心启动子的聚合酶链反应产物作为
【基金项目】
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国家自然科学基金,军队杰出人才基金,军队科技攻关青年基金,军队科技攻关项目
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目的通过筛选乙型肝炎病毒(HBV)核心启动子(core promoter)结合蛋白,为HBV复制机制的研究探索新的途径.方法应用噬菌体表面展示技术,以HBV核心启动子的聚合酶链反应产物作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮 "吸附-洗脱-扩增"的筛选过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列分析和同源性搜索.结果噬菌体经富集后,从随机筛选的20个克隆中得到6个阳性克隆,成功构建了克隆载体.序列测定后经过同源性搜索,确定了和HBV核心启动子结
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