【摘 要】
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为建立氧化还原因子-1（Ref-1）的原核表达系统,将经过酶切后的人源Ref-1编码片段定向克隆到pGEX-4T-3载体上,构建了pGEX-4T-3/Ref-1原核表达载体,重组质粒转化至BL21（DE3）工程菌,
【机 构】
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浙江师范大学化学与生命科学学院,艾青中学
【基金项目】
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金华市科学技术研究计划项目（2010-3-071）
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为建立氧化还原因子-1（Ref-1）的原核表达系统,将经过酶切后的人源Ref-1编码片段定向克隆到pGEX-4T-3载体上,构建了pGEX-4T-3/Ref-1原核表达载体,重组质粒转化至BL21（DE3）工程菌,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）诱导重组工程菌表达可溶性融合蛋白,谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B（Glutathione Sepha-rose 4B）亲和纯化重组蛋白,透析后用聚乙二醇8000（PEG8000）浓缩,获得纯度达92%的融合蛋白,产率为3.7 mg/L,融合蛋白占菌体总蛋白的6
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