【摘 要】
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目的探讨纳米二氧化硅(SiO2)诱导细胞损伤的作用机制研究。方法噻唑蓝比色(MTT)法检测20 nm和50 nm SiO20~1000 mg·L-1处理A549细胞24 h对细胞存活率的影响。纳米SiO225,50
【机 构】
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华东理工大学上海市功能性材料化学重点实验室,华东理工大学上海市新药设计重点实验室,药学院药剂教研组,上海市第一人民医院药剂科
【基金项目】
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上海市科学技术委员会资助项目(11DZ2260600);上海市科学技术委员会资助项目(10DZ2220500);华东理工大学交叉学科与重大项目培育基金(WY1213013 ECUST)~~
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目的探讨纳米二氧化硅(SiO2)诱导细胞损伤的作用机制研究。方法噻唑蓝比色(MTT)法检测20 nm和50 nm SiO20~1000 mg·L-1处理A549细胞24 h对细胞存活率的影响。纳米SiO225,50和100 mg·L-1处理细胞24 h后,检测细胞内超氧阴离子(O2-·)、羟自由基(·OH)、过氧化氢(H2O2)、一氧化氮自由基(NO·)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量以及细胞膜ATP酶的活性变化;采用荧光显微镜观察凋亡坏死细胞形态。结果 20 nm和50 nm SiO2对A549细胞的半数致死量(LD50)分别为30±4和(120±14)mg·L-1。与正常对照组比较,纳米SiO2引起A549细胞内O2-·,·OH,H2O2和NO·含量显著增加(P<0.05),ROS过量产生(P<0.05),脂质过氧化物MDA含量显著升高(P<0.05),且细胞存活率与ROS及MDA含量呈现明显的负相关性(R2=0.954和R2=0.937),ATP酶活性显著降低(P<0.05);Hoechst33342/PI双荧光染色法观察到明显的细胞凋亡与坏死。结论纳米SiO2可诱导细胞自由基过量生成,氧化应激反应加剧,导致脂质过氧化反应、细胞膜受损和细胞功能障碍,以及引发细胞凋亡与坏死,产生细胞毒性。
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