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研究背景
涡虫(图1)具备超强的再生能力。1898年,遗传学家摩尔根切下了涡虫整体重量1/279的小块组织,后来这个小块组织再生为了一个完整的个体。涡虫因此被誉为“切不死的动物”。近年研究发现,涡虫惊人的再生能力与其体内丰富的干细胞密切相关,涡虫受到创伤引发应激反应,随后通过相关信号调动体内干细胞的迁移、增殖与分化等生理过程。
应激蛋白HSP90是原核和真核生物细胞中与创伤、刺激和生长相关的重要基因。本研究推测,涡虫被切割后,组织缺失作为一种刺激引起涡虫应激反应,导致HSP90高表达,并设计实验以探究HSP90对涡虫再生能力的调控作用。
研究过程
实验通过喂食涡虫HSP90的dsRNA(图2),干扰涡虫基因表达,再用荧光定量qPCR方法检测涡虫再生及神经系统修复情况。图3所示为实验主要流程示意图。
研究结果与分析
HSP90是调控涡虫个体再生能力大小的关键基因
涡虫被切断后HSP90表达量明显增加:我们利用qRNA技术定量分析HSP90的表达变化。实验发现,涡虫切后6h和12h,HSP90的表达量明显增加,达到对照组的2倍左右;在切后24h,表达量恢复如初。我们推测,HSP90作为创伤应激反应的关键蛋白,它的表达量升高可能对涡虫再生过程的启动具有至关重要的作用。
dsRNA干扰涡虫HSP90的表达:为研究涡虫再生过程中HSP90的可能作用,我们利用RNAi技术,通过喂食dsRNA干扰HSP90表达,看涡虫再生过程是否受到影响。喂食dsRNA3次后的第3天,qPCR检测可以看出干扰组涡虫HSP90表达量明显比对照组低,差异极显著(P
涡虫(图1)具备超强的再生能力。1898年,遗传学家摩尔根切下了涡虫整体重量1/279的小块组织,后来这个小块组织再生为了一个完整的个体。涡虫因此被誉为“切不死的动物”。近年研究发现,涡虫惊人的再生能力与其体内丰富的干细胞密切相关,涡虫受到创伤引发应激反应,随后通过相关信号调动体内干细胞的迁移、增殖与分化等生理过程。
应激蛋白HSP90是原核和真核生物细胞中与创伤、刺激和生长相关的重要基因。本研究推测,涡虫被切割后,组织缺失作为一种刺激引起涡虫应激反应,导致HSP90高表达,并设计实验以探究HSP90对涡虫再生能力的调控作用。
研究过程
实验通过喂食涡虫HSP90的dsRNA(图2),干扰涡虫基因表达,再用荧光定量qPCR方法检测涡虫再生及神经系统修复情况。图3所示为实验主要流程示意图。
研究结果与分析
HSP90是调控涡虫个体再生能力大小的关键基因
涡虫被切断后HSP90表达量明显增加:我们利用qRNA技术定量分析HSP90的表达变化。实验发现,涡虫切后6h和12h,HSP90的表达量明显增加,达到对照组的2倍左右;在切后24h,表达量恢复如初。我们推测,HSP90作为创伤应激反应的关键蛋白,它的表达量升高可能对涡虫再生过程的启动具有至关重要的作用。
dsRNA干扰涡虫HSP90的表达:为研究涡虫再生过程中HSP90的可能作用,我们利用RNAi技术,通过喂食dsRNA干扰HSP90表达,看涡虫再生过程是否受到影响。喂食dsRNA3次后的第3天,qPCR检测可以看出干扰组涡虫HSP90表达量明显比对照组低,差异极显著(P