R060／SSA基因转染HEp-2细胞作为间接免疫荧光检测底物及其应用

• 作 者: 吕良敬 陈顺乐 顾越英 沈南 鲍春德 王元 薛峰 叶萍 俞种
• 机 构: 上海市风湿病学研究所自身抗原研究室,上海第二医科大学附属仁济医院风湿科
• 出 处: 标记免疫分析与临床
• 发表日期: 2006年1期
• 关键词: 自身抗原 R060/SSA 基因转染 HEP-2细胞 免疫荧光技术 Autoantigens Ro60/SSA Transfection Cells H
• 基金项目: 上海市科委资助项目（No.984419073）,上海市重点学科建设项目（T0203）

本研究拟改造间接免疫荧光技术（IIF）抗核抗体（ANA）检测法的底物HEp-2细胞，建立抗60kDRo60／SSA抗体免疫荧光检测法。采用PCR扩增人源Ro60 cDNA，克隆入真核表达载体pEGFP-C1，并转染HEp-2细胞。通过荧光显微镜、免疫印迹法（IBT）及IIF鉴定转染细胞（HEp-Ro60）中Ro60-绿色荧光蛋白（GFP）融合蛋白的表达和抗原性。分别以HEp-Ro60以及HEp-2为底物的IIF检测10份抗Ro／SSA对流免疫电泳（CIE）检测阳性、其他抗体阴性血清以及对照血清。获得的转染