口腔幽门螺杆菌基因定量测定方法的建立及其应用评价

• 作 者: 别明江 严谨 王保宁 谢艳 祝捷 王馨田 王红仁 李明远 杨
• 机 构: 四川大学华西基础医学与法医学院,四川大学华西医院消化内科,四川万可泰生物技术有限责任公司,成都树德中学,湖北医药学院附属人民医院感染性疾病科,十堰市人民医院中西结合科
• 出 处: 西部医学
• 发表日期: 2017年1期
• 关键词: 唾液 幽门螺杆菌 基因 定量检测 Oral cavity Helicobacter pylori Gene Quantitative detection
• 基金项目: 四川省科技厅应用基础研究项目（2014JY0201）,湖北医药学院研究生启动金资助计划项目（2015QDJZR08）,十堰市科技局研究与开发专项基金项目（16K70）,成都市科技局重点科研项目（2014-CP02-00079-GX）

目的建立一种通过口腔唾液的特异、灵敏测定幽门螺杆菌核酸DNA的荧光定量PCR方法，并对其进行临床比对评价，为快速、准确、无创检测幽门螺杆菌感染提供新方法。方法以高度保守的幽门螺杆菌16srRNA序列为靶序列设计引物，经Blast软件对相似序列比对后，筛选出一对最优并与常见胃肠道细菌无交叉反应的引物；用荧光定量PCR扩增，对引物的退火温度及反应体系进行优化，确立反应条件；用已知菌落数（CFU／ml）的幽门螺杆菌菌悬液与唾液混合，梯度稀释扩增测试后进行灵敏度分析，建立幽门螺杆菌菌落数（CFU／m1）和荧光定量