鸭梨ACC氧化酶基因cDNA片段的克隆及农杆菌介导的反义遗传转化

• 作 者: 齐靖 董祯 张玉星
• 机 构: 河北经贸大学生物科学与工程学院,河北女子职业技术学院,河北农业大学园艺学院
• 出 处: 植物分类与资源学报
• 发表日期: 2014年5期
• 关键词: 梨 ACC氧化酶 RT-PCR 反义表达载体 遗传转化 Yali pear ACC oxidase RT-PCR Antisense expression

研究根据ACC氧化酶基因的保守序列设计一对特异性引物。以鸭梨果实为试材，借助RT，PCR方法扩增得到一条长度为831bp的鸭梨ACC氧化酶基因eDNA片段，该片段编码276个氨基酸残基，与其它梨品种ACC氧化酶基因序列同源性均在94％以上。将此片段反向插入真核表达载体pBI121的CaMV35S启动子和NOS终止子之间，构建了鸭梨ACC氧化酶基因的反义表达载体．并在农杆菌LBA4404的介导下实现对鸭梨组培苗的遗传转化。经PCR鉴定证实共有4株鸭梨组培苗中外源基因得到成功转化，Southern杂交显示在这