伪狂犬病病毒Bartha株TK~-/LacZ~+突变株的构建及其生物学特性研究

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhangrong825
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本研究将伪狂犬病病毒Bartha株基因组与含有LacZ标志基因的TK基因转移质粒pUEKPZ共转染猪肾传代细胞PK-15,细胞出现病变后,反复冻融3次收毒,按1∶5稀释接种于IBRS-2细胞.在X-gal存在下挑取蓝斑,蓝斑筛选3次,再进行空斑试验,同时用PCR扩增LacZ基因,经3次空斑纯化,随机挑取的空斑均能扩增出LacZ基因,证实所获得的重组病毒为伪狂犬病病毒Bartha株TK-/LacZ+突变株.TCID50试验表明,TK失活对Bartha株在细胞上增殖无影响;Balb/C小鼠试验表明,该突变株对
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