【摘 要】
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目的 利用原核表达技术获得肺炎链球菌溶血素（PLY）重组蛋白,探讨其对肺炎链球菌感染性肺炎的血清学诊断价值.方法 根据GenBank中肺炎链球菌ply基因序列,切除羧基端33个核苷酸,
【基金项目】
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梅州市科技局立项项目(2014B104)
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目的 利用原核表达技术获得肺炎链球菌溶血素（PLY）重组蛋白,探讨其对肺炎链球菌感染性肺炎的血清学诊断价值.方法 根据GenBank中肺炎链球菌ply基因序列,切除羧基端33个核苷酸,设计合成特异性引物,从标准菌株的肺炎链球菌中提取DNA为模板,扩增目的基因ply,克隆后构建原核表达载体PET32a-ply,然后将其转化到大肠埃希菌DH5aBL21（DE3）中,以异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导其大量表达,获得融合6个组氨酸标签、无溶血活性的重组蛋白,经Ni-NTA树脂纯化,获得重组蛋白,经十二烷基磺酸
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