【摘 要】
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构建Bcr/Abl-Abd原核表达载体,并表达、观察对白血病细胞K562的影响。以慢性白血病PGD210质粒为模板,应用聚合酶链反应(PCR)扩增出Abd编码区序列,克隆入pMDl8t载体,经酶切测序鉴定正
【基金项目】
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863计划课题编号:2006AA02A111资助
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构建Bcr/Abl-Abd原核表达载体,并表达、观察对白血病细胞K562的影响。以慢性白血病PGD210质粒为模板,应用聚合酶链反应(PCR)扩增出Abd编码区序列,克隆入pMDl8t载体,经酶切测序鉴定正确。再通过酶切重组克隆入原核表达载体pET32a,构建pET32a-Abd重组表达质粒,经酶切、测序鉴定,序列、读码框均正确。通过转化EcoliBL21(DE3),经IPTG诱导表达,纯化。结果PCR扩增出特异性的501bp的目的片断,以此构建的重组质粒pET32a-Abd能够在上清中表达约36.6kd
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