【摘 要】
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目的克隆及表达幽门螺杆菌(Hp)相对分子质量为18 000的外膜蛋白基因,为Hp的疫苗开发、快速诊断试剂盒的研究奠定基础.方法用PCR从Hp染色体DNA扩增该外膜蛋白的基因片段,将目
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院,病毒性肝炎研究所
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目的克隆及表达幽门螺杆菌(Hp)相对分子质量为18 000的外膜蛋白基因,为Hp的疫苗开发、快速诊断试剂盒的研究奠定基础.方法用PCR从Hp染色体DNA扩增该外膜蛋白的基因片段,将目的基因、pQE30质粒同时分别经限制性内切酶BamHⅠ、HindⅢ酶切、纯化、连接、转染、筛选以及表达含插入片段的重组载体.结果经酶切、测序分析插入的基因片段为表达Hp相对分子质量为18 000外膜蛋白基因,与文献相比:有2%碱基发生变异,以及1.68%氨基酸残基改变,同源性可达到98%以上;SDS-PAGE显示:表达产物相对分子质量为18 000,可溶性表达占全菌的18%以上;ELISA法显示:该蛋白可被Hp全菌抗血清识别.结论 Hp外膜蛋白基因克隆表达产物具有良好的抗原性,将有可能成为一种有效蛋白质疫苗以及快速诊断试剂盒用于Hp感染的防治和检测.
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