【摘 要】
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目的:为了克隆单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)gD膜外区基因.方法:采用Vero细胞培养HSV-Ⅰ Stocker株,并提取病毒DNA作为PCR模板.PCR扩增出的gD片段经EcoR I和PstI双酶切,插入质粒p
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目的:为了克隆单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)gD膜外区基因.方法:采用Vero细胞培养HSV-Ⅰ Stocker株,并提取病毒DNA作为PCR模板.PCR扩增出的gD片段经EcoR I和PstI双酶切,插入质粒pBV220相应位点,转化E.coli DH5α.重组质粒经PCR、酶切鉴定命名为pBV220-gD.对克隆的HSV-I Stocker株gD基因进行序列分析,并与其他HSV-I、ⅡgD基因相应部分进行比较.结果:核苷酸序列同源性分别为99.77%、86.55%,氨基酸序列同源性分别为99.31%、88.28%.结论:HSV-I gD基因的克隆为表达该基因,进一步研制重组抗原诊断试剂、研究亚单位疫苗及gD、gD受体的结构功能奠定了基础.
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