【摘 要】
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目的 探讨一种较好的脐血造血干细胞(HSCs)的分离方法,以最大限度地分离出脐血中的HSCs,使其以高纯度、最佳生长状态用于治疗和研究.方法 取本院足月妊娠健康产妇的脐血20份,
【机 构】
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郑州大学第一附属医院儿科,郑州,450052郑州大学第一附属医院妇产科,郑州,450052;郑州大学第一附属医院小儿外科,郑州,450052;
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目的 探讨一种较好的脐血造血干细胞(HSCs)的分离方法,以最大限度地分离出脐血中的HSCs,使其以高纯度、最佳生长状态用于治疗和研究.方法 取本院足月妊娠健康产妇的脐血20份,每份均采用羟乙基淀粉沉淀(HES)法、淋巴细胞分离液( Ficoll)密度梯度离心法、免疫磁珠(MACS)法处理.比较3种方法分离后的单个核细胞(MNCs)回收率、锥虫蓝拒染率及CD34细胞阳性率；将以上3种方法所得细胞用完全培养基培养,不同时间点计数细胞,绘制生长曲线,并观察原代细胞的生长情况及其形态特征；并采用半固体琼脂培养法,计数其粒-巨噬细胞集落形成单位数.结果 HES法得到的MNCs回收率高于Ficoll密度梯度离心法和MACS法(Pa＜0.05)；锥虫蓝拒染率三者比较差异无统计学意义(P＞0.05)；MACS法所得细胞CD34阳性率明显高于另2种方法(Pa＜0.05),并且其所得细胞生长状态好,集落数最多；HES法和Ficoll法所得细胞,部分呈贴壁生长,与贴壁细胞共培养的细胞生长状态好；Ficon密度梯度离心法得到细胞生长状态最差,集落数最少.结论 HES法可作为一种首选常规分离脐血造血干细胞的方法；MACS法分离得到造血干细胞纯度高,适于实验及临床研究.
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