【摘 要】
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对编码结核分枝杆菌抗原Ag85B和ESAT-6的基因片段进行了扩增,并将其克隆入穿梭载体pKSV7,利用基因同源重组技术构建了表达结核分枝杆菌抗原Ag85B和ESAT-6的重组产单核细胞李
【机 构】
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扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划（973）项目（CB504404）, 国家自然科学基金项目（30425031）, 江苏省科技攻关项目（BE2007340 BK2008011）
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对编码结核分枝杆菌抗原Ag85B和ESAT-6的基因片段进行了扩增,并将其克隆入穿梭载体pKSV7,利用基因同源重组技术构建了表达结核分枝杆菌抗原Ag85B和ESAT-6的重组产单核细胞李斯特菌（LM）。结果表明,外源基因成功整合入LM基因组并获得转录;Western-blot分析结果显示,重组菌携带的外源基因在动物体内能够表达;溶血试验与细胞感染试验表明,较之野生型李斯特菌,外源基因的插入破坏了重组菌LM（pKSV7-H85-6B）的溶血活性,显著降低了对细胞的侵袭能力。证实,携带结核分枝杆菌保护性抗原
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